Analyse des mutations KRAS dans les cancers colorectaux métastatiques : Optimisation des techniques et des délais pour la sélection rationnelle d'une première ligne thérapeutique

摘要: L'analyse des mutations KRAS est un parametre primordial dans l'individualisation de la prise en charge therapeutique cancers colorectaux metastatiques (CCRm), notamment selection premiere ligne pouvant comporter anticorps anti-EGFR. L'optimisation cette analyse repose sur mise œuvre techniques biologie moleculaire robustes et rapides permettant reduction delais transmission resultats d'analyse. L'etude porte 790 CCRm analyses entre janvier 2008 decembre 2009. Apres prescription recherche KRAS, les echantillons tumoraux fixes inclus paraffine ont ete transmis par pathologistes hospitaliers ou prives ayant assure le diagnostic delai moyen 7,5 jours. histopathologique (coloration HES), macrodisseques pour assurer contenu materiel tumoral superieur a 20 %. L'ADN ensuite extrait partir 5 coupes 10 μm d'epaisseur. Les (codons 12 13 l'exon 2) recherchees 3 : 2 " HRM (high resolution melting), discrimination allelique (PCR TaqMan) une lente PCR-RFLP avec double digestion enzymatique. Sur echantillons, correlation statistiquement significative observee (κ > 0,9, p < 0,001). Une degradation excessive l'ADN empechant l'analyse 2,8 % (22/790) cas. detectees 40,6 (310/768) analysables, 82,3 (255/310) au niveau du codon 18 (55/310) 13. Parmi 549 lesquels utilisees, 15 cas (2,7 %) discordance releves. Dans ces cas, repetition procedure complete, l'extraction revele que 47 discordances etaient imputables RFLP, 36 technique TaqMan, l'HRM. A resultats, afin reduire duree mettre disposition prescripteurs resultat optimal, l'HRM PCR TaqMan utilisees intention recours, discordance. Cette nouvelle permis d'assurer 8,5 jours moyenne contre 10,5 l'ancienne procedure. optimisee permet aux envisageant recours anti-EGFR ligne, d'effectuer ce choix base rationnelle c'est-a-dire disposant statut KRAS.