Rol de la subunidad beta de la glucosidasa II en el control de calidad del plegamiento de glicoproteínas en el retículo endoplásmico

摘要: La Glucosidasa II (GII) cumple un rol fundamental en la biogenesis de glicoproteinas el reticulo endoplasmico (RE). Es responsable por remocion secuencial los dos residuos glucosa (Glc) mas internos del glicano (Glc3Man9GlcNAc2) transferido a Asn las nacientes via secretoria. GII participa ciclos Calnexina (CNX)/Calreticulina (CRT) ya que remueve residuo Glc agregado intermediarios plegamiento UDP-Glc:glicoproteina glucosiltransferasa (UGGT). es heterodimero soluble RE cuya subunidad α (GIIα) posee sitio catalitico mientras β (GIIβ) controvertido, si bien ha sido involucrada retencion y GIIα. En esta tesis demostramos ausencia GIIβ, catalitica GIIα levadura fision Schizosaccharomyces pombe (un organismo mecanismo control calidad proteinas similar al presente celulas mamiferos) adopta una conformacion activa capaz hidrolizar analogo sustrato p-nitrofenil-α-D-glucopiranosido. Sin embargo GIIβ necesaria para correcta localizacion deglucosilacion eficiente sustratos fisiologicos Glc2Man9GlcNAc2 Glc1Man9GlcNAc2. El dominio homologo lectina receptor Manosa 6-fosfato C-terminal interacciona con manosas ramas B y/o C N-glicanos mediando hidrolisis Demostramos, tambien, G2B N-terminal necesario interaccion GIIα-GIIβ. Por ultimo, reduccion contenido disminuyo significativamente in vivo mediada pero no afecto glucosilacion UGGT, favoreciendo formacion derivados monoglucosilados. Esto sugiere funcionaria como regulador permanencia CNX/CRT se pliegan muy lentamente, lo tanto han demanosiladas, otorgando oportunidades antes enviarlas degradacion.