Etude des mécanismes impliqués dans la mise en place et le contrôle de l'expression du gène neurogénine 3 dans le système nerveux central et le pancréas.

摘要: Relax chez le rat ou Neurogenine 3 (ngn3) la souris est un facteur de transcription famille basique Helice Boucle (bHLH). Le profil d'expression ce gene au cours du developpement embryonnaire indique qu'il pourrait jouer role fondamental dans determination devenir nerveux endocrine des precurseurs neuronaux et pancreatiques respectivement. premier objectif mon projet vise a elucider, les mecanismes moleculaires permettant rendre compte mise en place controle l'expression tissulaire restreinte ngn3. Cette etude realisee par transgenese, ete possible grâce l'installation laboratoire d'une plate-forme qui m'a permis generer modeles transgeniques facon autonome. J'ai donc realise differentes constructions d'exprimer β-galactosidase sous d'elements potentiellement « enhancer » promoteur caracterise element 3,85kb diriger rapporteur exclusivement territoires endogene L'etude fragment plus restreints se poursuit actuellement mais nous disposons l'un 2,2kb dirigeant transgenese LacZ l'hypothalamus ventral epitheliums intestinaux. second cette these d'obtenir marquage in vivo, transfert gene, population cellules souches pancreas exprimant ngn3 explants embryonnaires murins puis humains. En effet, d'un systeme vivo unique capable recapituler xenogreffe d'ebauches pancreatiques. Jai demontre, modele experimental, capacite lentivirus recombinants infecter efficacement progenitrices pancreas, ciblant l'aide promoteurs specifiques populations cellulaires sont differenciees. La construction production vecteur lentiviral assurant GFP (Green Fluorescent protein) l'element ngn3, permet transduire murins. transposition ces tissu humain validee. Ce travail donne acces, l'homme, reservoir endocrine. L'amplification selection telles constituent defi majeur pour nouvelles therapies diabete type I. fonction proendocrine etant deja clairement etablie niveau troisieme consiste demontrer neuronale moelle epiniere. Dans cadre determination, l'absence differenciation neurones attendue suite l'inactivation Nous avons pu que mutation nulle induit ectopique Mash1 region ventrale epiniere normalement ainsi, une compensation fonctionnelle. Afin d'apprehender directement cela absence compensation, genere doubles mutant nulles Mash1-Ngn3. L'analyse phenotypique mutants perte Mash1/ngn3 neuronal. De avons, premiere fois, etabli matures dont determinee presentent phenotype glutamatergique. Mots cles : Ngn3, bHLH, expression tissu-specifique, regions regulatrices, embryons fondateurs, ciblage progeniteurs/souches, fonctions proneurale