S-layer de Bacillus sphaericus: caracterización, regulación, análisis funcional y aplicaciones

摘要: Las cepas de Bacillus sphaericus 2362 (cepa referencia), C7 y C11 (nuevos aislamientos) todas pertenecientes al grupo IIA, son entomopatogenas contra larvas mosquitos. Ademas las envolturas habituales bacterias Gram positivas, estas estan recubiertas una capa externa estructura proteica cristalina: la S o Surface layer (S-layer) que estaria asociada un polimero secundario pared (SWCP). En 3 se observa proteina S-layer tiene PM aproximadamente 125 kDa es reconocida por el mismo anticuerpo. Tratamientos con LiCl, remueven sin afectar viabilidad, permitieron observar en esa condicion celulas (carentes S-layer) crecen mas lentamente medios hipersalinos solo recuperar S-layer. El analisis western blot anticuerpo anti cepa 2362, mostro tratadas sintesis inicio muy temprano durante crecimiento bacteriano. modificaciones tamano, concentracion, ubicacion (fijadas a membrana, esporas, libres sobrenadante) funcion etapas su condiciones estres hiperosmotico (altas concentraciones NaCl), nos indican posibles postraduccionales, siendo glicosilacion frecuentemente reportada. Los resultados agregacion cultivos tincion azul bromo-timol fueron contradictorios respecto presencia cuando comprarn los empleando kit comercial distingue proteinas glicosiladas. Se discuten distintas posibilidades: Oglicosilacion no enzimatica, desprendimiento SWCP. Por otro lado exploraron dos funciones importantes aportarian bacteria: bioabsorcion metales actividad mosquitocida. Distintas especies han sido involucradas asociacion como bioadsorbentes, pero hasta momento hay claro entendimiento propiedades quelantes. Con ese objetivo, analizo capacidad bioadsorcion cobre esporas positivas producen Solo aquellas provistas S-layer, B. thuringiensis, mostraron significativa tanto esporas. Esta (cercana 50%) retuvo luego proceso calentamiento suave cultivos, indicando elementos estructurales envoltura responsables esta propiedad. purificadas mantuvieron bioadsorber mostrando propiedad directamente ellas. determinaron parametros para responden modelo Langmuir. Tanto afinidad comparables otros bioadsorbentes origen observo efecto competitivo Ca2+ Zn2+, aunque Cd2+, lo indicaria podria retener ademas explicaria persistencia ambientes contaminados. La utilizacion del anti-S-layer permitio determinar permanece adherida espora lavados intensivos (que eliminan Slayer) captan eficientemente cobre. primera vez correlacion directa entre contenido bioadsorcion. ligada retencion adheridas Bacillus. Algunas toxicas mosquitos, sus insecticidas deben principalmente inclusion cristal produce esporulacion. inspecciono insecticida C7. encontro per muestran Culex. experimentos preparaciones espora-cristal conjunto sinergico aportado proteina. particular aumenta rango huesped hacia mosquitos genero Aedes cuales sphaercius eficiente. in silico Slayer motivo hemolitica fue confirmado realizados vitro. toxicidad