Commutation de classe et effet néo sur les interactions de longue distance dans le locus des chaînes lourdes d'immunoglobulines

摘要: Le gene neo(R) est couramment utilise comme marqueur de selection dans les experiences recombinaison homologue. Mais il egalement revelateur des mecanismes sous-jacents aux interactions longue distance loci complexes le locus IgH. Dans ce contexte, mon travail these a porte sur perturbations generees par remplacement sequences du IgH neoR. premier modele correspond souris mutantes lesquelles la quasi-totalite l'intron Iµ-Cµ (mais laissant intactes necessaires un epissage correct pre-messagers µ) ete remplace neo(R). Nous avons trouve que compartiment B etait profondement altere avec blocage stades precoces developpement. En consequence, une faible proportion cellules atteint organes lymphoides secondaires. La transcription germinale initiee partir promoteur Iµ bloquee. second modele, nous genere neoR insere en aval l'exon Iγ3 intacts tous elements pour et l'epissage normal transcrits γ. L'expression interfere provoque diminution commutation classe vers IgG3. De plus, cette etude montre apporte germinaux l'activation deux nouveaux sites cryptiques d'epissage, l'un region codante l'autre Iγ3-Cγ3. Une autre partie mise evidence d'une interchromosomique au cours chez souris. premiere realisee lignee murine fr-Vκ laquelle allele chaine lourde rendu non fonctionnel l'insertion d'un exon legere entre JH4 Eµ. Ce permis montrer phenomene trans-recombinaison participe activement IgA seconde etude, isotypes d'anticorps permet re-expression exclu (au rearrangements VDJ) lors developpement precoce