Physiologie du compartiment endothélial circulant dans l’hypertension artérielle pulmonaire et perspectives de développement d’un produit de thérapie cellulaire

摘要: L’endothelium joue un role primordial dans le developpement et maintien des multiples fonctions vasculaires. Il est ainsi largement implique situations pathologiques comme les maladies cardio-vasculaires. La description de marqueurs endotheliaux circulants a permis une exploration non invasive l'endothelium. Notre equipe s’est interessee principalement aux cellules endotheliales circulantes (CEC), dont taux reflete la lesion ou l’activation l’endothelium, progeniteurs (PEC), regeneration endotheliale. decouverte en 1997 par Asahara presence chez l’adulte ces PEC, participant formation nouveaux vaisseaux vasculogenese, ouvert nouvelles perspectives, notamment pour therapie cellulaire pathologies ischemiques. Ce travail consiste developper methodes d’etude plusieurs contextes. Tout d’abord, nous avons explore l’utilite physiopathologie l’hypertension arterielle pulmonaire (HTAP). Puis analyse potentiel mobilisation partir paroi vasculaire lors d’une ischemie locale volontaires sains cadre du d’un produit autologue. Une partie ce projet ete mettre place d’optimiser techniques marqueurs. Les CEC ont quantifiees immunoseparation magnetique (IMS), technique mise au point 1992 (Dignat-George 1992) transferee notre laboratoire. quantification PEC realisee cytometrie flux culture cellulaire. En culture, deux types sont decrits : precoces, l’origine monocytaire lesquels deja standardisee, « Endothelial Colony Forming Cells » (ECFC), seules presentant caracteristiques progenitrices pouvant etre proposees Nous optimise ECFC etudiant l’effet diverses matrices densite d’ensemencement mononucleees issues sang total sur l’obtention leurs proprietes angiogenes. dysfonction endotheliale decrite element central l’HTAP diagnostic repose mesure pression catheterisme cardiaque droit. l’absence marqueur biologique invasif cette maladie, quantifie etudes. etude patients adultes montre augmentation specifique thromboembolique chronique. Ainsi semblent reflet lesions pulmonaires severite clinique patients. L’autre l’interet prise charge therapeutique enfants souffrant d’HTAP secondaire cardiopathie congenitale, formes irreversibles presentaient eleves CEC. defini nouveau utilite diagnostique pronostique. rares circulant, difficiles expandre, essais medullaire se reveles insuffisants. L’hypothese recente reserve conduits etudier processus d’ischemie sains. Deux groupes d'âge inclus afin d'evaluer l'impact vieillissement methode etudiee. Malgre effet dilatation n’a pas mobiliser significativement issus endotheliale, quel que soit l'âge sujets. A l’inverse, l’hypoxie eu deletere capacites angiogenes ECFC.