Le marquage des peptides avec des métaux et détection par MS et l'optimisation des procédures de l'extraction de métalloprotéin dans les échantillons biologiques à des fins de protéomique

摘要: Ce travail a developpe une nouvelle methode pour l'identification et la quantification des peptides, par l'optimisation de certaines strategies disponibles appropriees le marquage peptides avec metaux lanthanide, separation nano-HPLC detection UV, suivi MALDI MS. Tout d'abord, les ont ete marques trois lanthanides differents un reactif fonctionnel - DOTA. Les resultats montrent que reaction transformation en derive l'aide du chelateur DOTA-NHS-ester efficace individuels melanges verifiees partir relation m/z obtenue L'application optimisee d’un complexe (Cytochrome C digest) montre comparables ceux obtenus modeles. En parallele, nous avons effectue l’optimisation purification metalloproteine dans bile poisson, qui est signalee entant biomarqueurs contamination metallique l'environnement. Des procedures differentes (differents moments centrifugation temperatures traitement thermique) agents (DTT, β-mercaptoethanol TCEP) reduisant apliques purifier MT isolees foie poissons (Oreochromis niloticus). analyses spectrophotometriques utilisees quantifier echantillons MT, gel SDS-PAGE utilise evaluer qualitativement procedure. Chaque procedure suite evaluee statistiquement, mehtode surfaces reponse appliquee. semblent etre plus adequate surveillance l'environnement ce concerne l'exposition recente xenobiotiques peuvent influer sur l'expression proteomique metalloproteomique cette matrice biologique. Une d’exposition laboratoire etaient significativement importante l’evaluation selon donnees techinique reseau neural.