BB 16. Influência da concentração inicial de substrato na atividade hidrolítica da lipase comercial de Pâncreas de porco

摘要: Introducao: Dentre os biocatalisadores disponiveis, destaque especial deve ser dado as lipases, enzimas que nao requerem cofatores, sao regioespecificas e atuam em uma larga faixa de pH. Sao amplamente encontradas na natureza, podendo obtidas a partir microrganismos ou fontes animais vegetais, com variacoes suas propriedades cataliticas. Catalisam hidrolise total parcial triglicerideos, atuando sobre ligacoes esteres presentes molecula, promovendo liberacao acidos graxos glicerol. Os triglicerideos principais constituintes oleos gorduras, componentes essenciais da dieta humana, fornecendo energia transportando agentes quimicos orgânicos soluveis, como vitaminas. De forma avaliar o potencial hidrolitico das deve-se efetuar determinacao atividade enzimatica. Um dos metodos mais utilizados para lipases titulacao liberados apos realizacao reacao Objetivo: Verificar efeito concentracao do substrato hidrolitica azeite oliva pela lipase comercial pâncreas porco. Metodologia: Empregou-se porco adquirida empresa Sigma-Aldrich. O foi composto por emulsao agua, 7% (m/v) goma arabica (em relacao ao volume agua) diferentes proporcoes (5–70%, correspondeu variacao molaridade 186-2604 mM). Em frascos Erlenmeyer 125 mL, foram adicionados: 5 mL substrato, 4 solucao tampao fosfato sodio (0,1 M, pH 8,0) 1 preparacao enzimatica (0,1mg/mL). incubados 37°C 10 min, shaker agitacao (150 rpm). Apos periodo incubacao, paralisada adicao 20 mistura acetona: etanol (1:1). Foram adicionados KOH 0,05 N excesso titulado HCl 0,05N, utilizando fenolftaleina indicador. Determinou-se expressa U/g unidade (U) definida quantidade enzima libera 1μmol acido graxo minuto, nas condicoes ensaio. Resultados discussao: calculadas velocidades cineticas reacoes enzimaticas concentracoes. A maior lipolitica (10700 U/g) ocorreu 50% (1860 resultados obtidos, possivel determinar parâmetros cineticos (Km Vmax) valores obtidos VMax Km 200 45,82 mM, respectivamente. Conclusao: proporcionou melhores esta condicao sera empregada comerciais microbianas nos estudos subsequentes caracterizacao aplicacao destas enzimas.