Charakterisierung der Wechselwirkungen zwischen dem Notch-Signalweg und intrinsischen und extrinsischen Signalen in hämatopoetischen Zellen

摘要: Der Notch-Signalweg ist ein wichtiger Regulator von Differenzierungsprozessen, Proliferationsvorgangen und der Apoptose. Die zugrundeliegenden molekularen Mechanismen, die eine so breite Wirkungspalette ermoglichen, sind jedoch weitgehend unverstanden. Ziel dieser Arbeit war es, Notch1 dessen Zusammenspiel mit verschiedenen Interaktionspartnern in hamatopoetischen Zellen genauer zu charakterisieren. Unter Verwendung multipotenten Zelllinie FDCPmix, die Tamoxifen-induzierbares System konstitutiv aktiven intrazellularen Domane des Notch1-Rezeptors tragt, sollte Einfluss auf die Differenzierung Proliferation hamatopoetischer untersucht werden. Im ersten Projekt wurde Wirkung Erythropoese analysiert. Notch1 beschleunigte dabei erythroide Differenzierung erhohte Expression β- Globin, indem Notch1-Signalweg uber das Effektormolekul RBP-J hypersensitive Stelle 2 (HS2) Locus-Kontroll-Region β-Globins aktiviert. der erythroiden Transkriptionsfaktoren Gata1, Fog1, Eklf Nfe2 dagegen durch die Aktivierung nicht beeinflusst. Das zweite Projekt beschaftigte sich mit der funktionellen Interaktion Notch1-Signalweges p53, einem wichtigen Faktor der Tumorsuppression Proliferationsarrests. Aktivierung in hamatopoetischen fuhrte zu p53-abhangigen Zellzyklusblock. Dabei wurde durch Zellzyklusregulators p21Waf/Cip p53Wildtyp, aber in p53null FDCP-mix-Zellen erhoht. Regulation p21Waf/Cip-Expression Notch1 erfolgte hierbei RBP-J, sondern verstarkte Bindung p53 an den p21Waf/Cip-Promoter. Eine Wiedereinbringung p53-Gens p53null stellte den Notch1-vermittelten Zellzyklusblock wieder her. In weiteren der Einfluss Caspasen, fur apoptotische Prozesse verantwortlich sind, untersucht. Vorarbeiten gezeigte Caspase-6 mRNA Notch1 konnte Proteinebene weder noch Caspase-3 bestatigt werden. Jedoch Caspase-7 verstarkt, was allerdings einer erhohten Apoptoserate fuhrte. Weitere Forschung muss hier aufzeigen, ob Caspasen Differenzierungsprozesse hat und wie diese molekular vermittelt wird.