Estudi genètic integral de la regió 4p15 i identificació de PI4K2B i STIM2 com a gens alterats en càncer colorectal

摘要: DE LA TESI:El diagrama complet de les pertorbacions genetiques i epigenetiques que afecten el cancer colorectal (CCR) esta lluny ser totalment conegut. L'LOH es una alteracions mes recurrents en CCR aixi com d'altres neoplasies. Acostuma a un bon indicador la presencia gens rellevants per carcinogenesi. L'estudi somatiques situats aquestes regions desequilibri al·lelic ha estat fonamental passat identificacio d'alguns dels supressors tumorals coneguts, cas p53, Smad4, p16, APC o Rb. Els desequilibris al·lelics 4p s'han associat amb major agressivitat pitjor pronostic pacients CCR, malgrat els diana d'aquests resten encara identificats. En aquesta tesi s'ha dut terme treball d'analisi genetica integral regio critica situada 4p15 am intencio localitzar-hi probablement estiguin contribuint progressio tumoral. Hem realitzat exhaustiu d'al·lotipat mitjancant utilitzacio marcadors microsatel·lit, sobre model tumors xenoempeltats ratolins atimics. identificat al candidats han analitzats d'acord seves possibles i/o epigenetiques. Tambe hem analitzat patrons d'expressio tal d'identificar transcripcionals. Mitjancant prediccions regulacio transcripcional bioinformatiques trobat PI4K2B STIM2 son dos regulats TCF4/B-catenina. Aixo confirmat immunoprecipitacio cromatines. avaluat valor aquests seu predictors resposta tractament basat 5-FU CCR. A mes, experiments deplecio mitjancada siRNA linies cel·lulars alhora transfectat forma estable gens. Finalment assajos formacio immunodeprimits comprovar si sobreexpressio nostres te no efecte generats partir cel·lulars. LOH identificats descarten que, s'havia proposat, doni l'estadi metastatic acumulacio d'aquestes alteracions. detectat correlaciona dosi genica, dir perdues d'heterozigositat comporten perdua material genetic consequencia processos recombinacio mitotica duplicacio associats escenari d'inestabilitat cromosomica. d'aquesta portadors mutacions, microdelecions ni delecions homozigosi, tampoc presenten metilacio promotores. Per contra, vam trobar estaven significativament sobreexpressats afectes metastasi hepatiques (MH) independentment d'LOH, seva transcripcio estava sot control del complex nivells elevats PI4K2B, tant proteina d'mRNA estan assocats millor quimioterapic Finalment, estudis demostrat silenciament comporta increment significatiu proliferacio cel·lular resulta disminucio volum tumoral supressio proliferacio. Conclusions: dianes via B-catenina. La supressor cel·lular, alhora, impacte colorectal.