Differentiation of three Bursaphelenchus species by means of RAPD-PCR.

摘要: The RAPD-PCR (Random Amplified Polymorphie DNA-Polymerase Chain Reaction) technique has been developed to differentiate the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus , from two related species. We have examined 14 isolates of B. 12 mucronatus 7 fraudulentus and 2 undetermined provenances obtained Asia, Europe North America. nematodes were multiplied on Botrytis cinerea malt agar, tested with 13 different ten base random primers Operon kits 8, E, Y Z. Informative patterns amplified DNA fragments revealing interspecific as well intraspecific differences. Reliable differentiation identification was possible primer OPY-0 1 whereas could be distinguished using OPB-07. Primer OPZ-08 most suitable for B.fraudulentus . Our results confirmed assignment C isolate Canada proposed by HARMEY (1993). Different RAPD Japan China in relation Europe, Siberia Canada. These findings support thesis BECKENBACH et al. (1992) about a separate taxonomic status latter isolates. undefined USA corresponded European species Further investigations will focused providing better various Differenzierung von drei Bursaphelenchus-Arten durch Ziel der Untersuchungen war die Anwendung RAPD-PCR-Methode zur taxonomischen Unterscheidung des Kiefernholznematoden, verwandten Arten. Die zu diesem Zweck verwendeten Isolate und -Isolate unbekannter Zugehorigkeit stammten aus Asien, Europa Nordamerika wurden an auf Malzagar vermehrt. Sie mit unterschiedlichen 10-basigen Zufallsprimern Operon-Kits B, Z getestet. Hierbei informative Bandenmuster amplifizierten DNA-Fragmente erhalten, inter- intraspezifische Unterschiede widerspiegelten. Eine zuverlassige Identifizierung OPY-01 moglich, wahrend OPB-07 gegenuber abgegrenzt werden konnte. Zur am besten geeignet. Unsere Ergebnisse bestatigten taxonomische Zuordnung kanadischen C2-Isolates Art den RAPD-Bandenmustern zwischen Isolaten einerseits Europa, Sibirien Kanada andererseits stutzen hinsichtlich eines separaten Status letztgenannten Herkunfte. beiden undefinierten entsprechen denen europaischen Weitere besseren intraspezifischen innerhalb Arten sind vorgesehen.