Differentiation Potentials of Canine Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

摘要: บทคดยอ เซลลตนกำเนดมเซนไคม (MSCs) เปนเซลลทมความสามารถในการเจรญเพมจำนวนไดเองและสามารถพฒนาเปนเซลลจำเพาะหลายชนดโดยเฉพาะเซลลในกลมเนอเยอชนกลาง การศกษาครงนมวตถประสงค เพอศกษาวธการเกบ การพสจน และการตรวจสอบคณสมบตการเจรญเปลยนแปลงของเซลลตนกำเนดมเซนไคมของสนข ภายหลงการเกบของเหลวจากโพรงกระดกสนข ทำการเลยงเซลลเพอเพมจำนวนและทำการตรวจลกษณะรปรางและอตราเรวของการเพมจำนวนเซลลเปนสองเทา จากนนทำการตรวจการแสดงออกของโปรตนบนผวเซลลชนด CD 34 44 90 ดวยเทคนคโฟลวไซโตเมตร และตรวจคณสมบตของเซลลในการเจรญเปลยนแปลงเปนเซลลในกลมเนอเยอชนกลาง (กระดก กระดกออน และ ไขมน) และเนอเยอชนนอก (เซลลประสาท) ใชเทคนคทางจลพยาธวทยารวมกบการยอมส VonKossa Alcian blue รวมถงการแสดงออกของ mRNA ตอยน GLA COL1A1 ในการตรวจวนจฉยกระดกและกระดกออนตามลำดบ และใช Oil Red O ในการตรวจเนอเยอไขมนเซลล MSCs ทเกาะบนจานเพาะเลยงพลาสตกมคณสมบตในการแบงตวโดยมคาเฉลยของระยะเวลาการเพมจำนวนเปนสองเทาเทากบ 35.4±9.3 ชวโมง เซลล มลกษณะคลายเซลลไฟโบรบลาส ใหผลบวกตอการแสดงออกของโปรตนจำเพาะตอเซลล MSC (CD44 90) ในขณะทเซลลจำนวนนอยกวารอยละ 5 ใหผลบวกตอเซลลตนกำเนดเลอด (CD 34) จากการตรวจคณสมบตของเซลลดวยเทคนคทางจลพยาธวทยาและการแสดงออกของยน พบวาเซลลเหลานสามารถเจรญพฒนาเปนเซลลกระดก เซลลไขมนไดการศกษาครงนสรปวาเซลล ทเจาะเกบจากโพรงกระดกสนขมความสามารถในการเจรญพฒนาในจานเพาะเลยงใหเปนเซลลในกลมเนอเยอชนกลางได คำสำคญ: ไขกระดก สนข Abstract Mesenchymal stem cells are multipotent that have characteristics of self-renewal anddifferentiation into various specific cell types, in particular mesodermal lineages. This study aimed at isolating,identifying and examining the differentiation capability canine MSCs. Bone marrow aspirates were obtained from4 dogs. Putative then cultured medium subpassaged. At 3rd to 5th passages, wereexamined for their morphology doubling time. Two lines examined expression 34, 44and 90, using flow cytometry. The vitro these lineages (bone, cartilageand adipose tissues) ectodermal lineage (neuron) was performed osteogenic, chondrogenic, adipogenic andneurogenic media, respectively. Histological examinations (Von Kossa alcian staining) mRNAexpressions (GLA COL1A1) used examine bone cartilage differentiation, while red stainingwas determine differentiation. Plastic-adhered had high potential division, with a mean time hours.These fibroblast-like expressed markers 90), fewer than 5% weretested positive hemopoietic marker (CD34). Based on histological geneexpressions, demonstrated ability differentiate bone, tissues. Inconclusion, can be isolated from capable intospecific Keywords: marrow, canine, mesenchymal