Development of an enzyme-linked immunosorbent assay for detection of circulating IgG autoantibodies against canine desmoglein 3 in dogs with pemphigus

摘要: Pemphigus, a group of autoimmune blistering dermatoses recognized in humans and dogs, is divided into three subgroups: pemphigus vulgaris (PV), foliaceus (PF) paraneoplastic (PNP). Previously, we have demonstrated that circulating anti-desmoglein 3 (Dsg3) IgG dogs with PV PNP disrupts Dsg3-mediated keratinocyte cell–cell adhesion. The aim this study was to develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection against canine Dsg3 pemphigus. A secreted form recombinant protein representing entire extracellular domain (cDsg3) produced by baculovirus expression used as coated antigen ELISA. titre anti-cDsg3 ELISA significantly higher (n = 14) than healthy (n = 44) (P < 0.05). Of sera, 11/14 (79%) sera serum were positive On other hand, 14/37 (38%) from PF 9/18 (50%) subepidermal bullous Circulating cDsg3 not superficial pyoderma (n = 5), atopic dermatitis (n = 8), or (n = 44). Moreover, immunoreactivity all 21 completely absorbed preincubation cDsg3. These findings altogether suggest can be rapid screening test anti-Dsg3 autoantibodies pemphigus. Resume  Les pemphigus, groupe de autoimmunes decrit chez l’homme et le chien, est subdivise en vulgaire foliace paraneoplasique Precedemment, il ete demontre que les anti-desmogleine circulantes chiens atteints ou interferent avec l’adhesion inter-keratinocytaire liee la Dsg3. Le but cette etude etait developper un des dirigees contre Une forme secretee proteine recombinante representant domaine extracellulaire entier produit par bacilovirus utilise comme l’antigene couverture dans significativement plus eleve sains Les serums 11 sur 14 du chien atteint PNP, etaient positifs pour anti-cDsg3. D’autre part, bulleuses sous-epidermiques presentaient positif. n’ont pas reconnus pyodermite superficielle dermatite atopique De plus, l’immunoreactivite completement absorbee cas apres incubation Ces resultats suggerent peut etre rapide depistage circulante canin. Resumen Penfigo, grupo dermatosis autoinmunes vesiculares reconocido humanos y perros, se divide tres grupos: penfigo vulgar foliaceo paraneoplasico Previamente hemos demostrado frente desmogleina perros con altera adhesion intercellular queratinocitos mediada por esa proteina. El proposito este estudio fue desarrollar una prueba para deteccion penfigo. Se produjo mediante expresion forma secretada proteina representa el dominio extracelular canina (cDsg3), utilizo como antigeno titulo significativamente mayor sanos los sueros caninos fueron poitivos Por otra parte, bullosas subepidermales positivos no reconocida pioderma atopica (n = 8) o Ademas, inmuoreactividad completamente neutralizada preincubacion Estos hallazgos su conjunto sugieren puede utilizarse rapida muestreo autoanticuerpos penfigo. Zusammenfassung Pemphigus, eine Gruppe von autoimmunen blasenbildenden Dermatosen, die bei Menschen und Hunden vorkommt, wird drei Untergruppen eingeteilt: Pemphigus paraneoplastischer In fruheren Studien haben wir gezeigt, dass zirkulierende Anti-Desmoglein mit Dsg3-vermittelte Keratinozyten Zell-Zell Adhasion storen. Das Ziel dieser Studie war es, einen Enzyme-linked Immunosorbent Assay zu entwickeln, um gegen canines ermitteln. Mittels Baculovirus-Expression wurde sezernierte Form eines rekombinanten Proteins produziert, welches gesamte extrazellulare Domane caninen reprasentierte als Coating-Antigen im verwendet wurde. Der Titer Anti-cDsg3 beim signifikant hoher gesunden Von den Seren waren der das Serum positiv Andererseits caninem subepidermalen bullosen Dermatosen positiv. Zirkulierende wurden oberflachlicher Pyodermie atopischer Dermatitis oder nicht gefunden. Uberdies Immunreaktivitat allen durch Prainkubation vollig absorbiert. Zusammengefasst weisen diese Ergebnisse darauf hin, rascher Screening Test fur Bestimmung zirkulierenden Anti-Dsg3 Autoantikorpern werden kann.